牛津杯法抑菌試驗(又稱管碟法、杯碟法)是《中國藥典》收錄的標準抗生素效價測定方法，通過瓊脂擴散形成的抑菌圈評估抗菌效能?。

　　其核心原理為抗生素在瓊脂中形成球面擴散梯度，高濃度區(qū)域抑制細菌生長產(chǎn)生透明抑菌圈，直徑與抗生素效價呈正相關?。

　　?標準操作流程?

　　?菌懸液制備?

　　使用18-24小時新鮮培養(yǎng)物，通過比濁法調(diào)整濃度至1×10?-8 CFU/mL?。

　　?含菌平板制備?

　　滅菌培養(yǎng)基冷卻至45℃后加入菌懸液，混合均勻傾注平板，最終含菌量控制在5×10?-6 CFU/mL?。

　　?牛津杯放置?

　　內(nèi)徑6mm、外徑8mm、高10mm的不銹鋼牛津杯需垂直放置于培養(yǎng)基表面，間距>15mm以避免抑菌圈重疊?。

　　?樣品加注?

　　注入100-150μL待測液，粘稠樣品需分次填實，加樣量偏差需控制?。

　　?培養(yǎng)與測量?

　　37℃恒溫培養(yǎng)16-20小時后，采用十字交叉法測量抑菌圈直徑，精度需達0.1mm?

　　?關鍵影響因素?

　　?瓊脂厚度?：3mm厚度可優(yōu)化擴散效果，過厚(如5mm)可能導致抑菌圈直徑差異達23mm?。

　　?菌液濃度?：超過5×10? CFU/mL會升高最低抑菌濃度，影響結果準確性?。

　　?溫度控制?：培養(yǎng)溫度需嚴格保持37℃±1℃，以確保細菌正常生長與抑菌圈清晰度?。

　　?應用領域?

　　?抗生素效價測定?：通過二劑量法或三劑量法設計濃度梯度，計算相對效價(誤差≤5%)?。

　　?藥敏試驗?：如金黃色葡萄球菌對青霉素的敏感標準為抑菌圈直徑≥20mm?。

　　?日化產(chǎn)品檢測?：適用于膏霜、牙膏等粘稠樣品的抗菌性能評估?