熔解曲線出現(xiàn)雙峰的原因

　　引物設(shè)計(jì)不夠優(yōu)化：應(yīng)避免引物二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。

　　引物濃度不佳：適當(dāng)降低引物的濃度，并注意上下游引物的濃度配比。

　　鎂離子濃度過(guò)高：適當(dāng)降低鎂離子濃度，或選擇更合適的 mix 試劑盒。

　　模板有基因組的污染：RNA提取過(guò)程中避免基因組DNA的引入，或通過(guò)引物設(shè)計(jì)避免非特異擴(kuò)增。