Masson三色染色法是一種經(jīng)典的組織學染色技術，主要用于顯示組織中的膠原纖維、肌肉纖維和細胞核等結構。在皮膚組織學研究中，Masson染色特別適用于觀察膠原纖維的分布和排列情況，這對于評估皮膚的結構完整性、傷口愈合過程以及皮膚病的研究都非常有用。

　　下面是進行小鼠皮膚組織的Masson三色染色的一般步驟：

　　準備工作

　　組織固定：采集小鼠皮膚樣本后立即放入10%中性甲醛溶液中固定至少24小時。

　　脫水和透明：固定后的組織經(jīng)過一系列酒精梯度(70%、80%、90%、100%)進行脫水，然后用二甲苯進行透明處理。

　　包埋：將透明后的組織塊包埋在石蠟中，制作成石蠟塊。

　　切片：使用輪轉式切片機將石蠟塊切成4-6微米厚的連續(xù)切片，并將其貼附在載玻片上。

　　Masson三色染色步驟

　　脫蠟：將切片置于二甲苯中脫蠟3次，每次5分鐘，然后依次通過100%、90%、70%酒精進行再水化。

　　核固紅染色：將切片置于0.1%核固紅(Weigert's Iron Hematoxylin)染色液中染色10分鐘，然后用水沖洗。

　　分化：用1%醋酸溶液分化30秒至1分鐘，直到背景變?yōu)榈S色。

　　Biebrich Scarlet-Acid Fuchsin染色：將切片置于Biebrich Scarlet-Acid Fuchsin染色液中染色10分鐘，此步驟用于染色肌肉纖維和膠原纖維。

　　磷鉬酸分化：用1%磷鉬酸溶液分化3-5分鐘，直到背景變得清澈。

　　Phosphomolybdic Acid染色：將切片置于0.5% Phosphomolybdic Acid溶液中染色10分鐘，這一步驟用于進一步增強膠原纖維的顏色。

　　Aniline Blue染色：將切片置于1% Aniline Blue溶液中染色5分鐘，用于染色膠原纖維。

　　脫水和封片：依次通過70%、90%、100%酒精脫水，最后用二甲苯透明，滴加中性樹膠封片。